Введение растений в культуру in vitro. Часть 2
Не прошло и месяца, и вот я снова с вами)
Часть 1 тут - Клональное микроразмножение растений in vitro
Суть метода заключается в тотипотентности клеток растений. Само понятие тотипотентность - это способность из одной клетки развить целый организм со всеми его органами. У растений эта тотипотентность сохраняется в апикальных почках на конусе нарастания, в мерстеме, на протяжении всей жизни, но также можно получить конгломерат недиффириенцированных клеток (каллус) практически из любой другой части растения.
Получили каллус, сейчас обработаем гормонами и попрут из него цветы)
Фото отсюда: https://m.vk.com/meristem
Итак, методы введения в культуры растений in vitro можно условно разделить на два: непрямой органогенез (введение через каллус из листьев, листовых черешков и пр.) и прямой (введение меристемой, черенком, семенами).
Для достижения стерильности, растительные экспланты подвергаются поверхностной стерилизации различными агентами типа гипохлорита натрия, нитрата ртути, пероксида водорода и пр. А после переносятся на питательную среду, где уже начинается дальнейшее развитие.
1) Как только я узнал про клональное микроразмножения, я думал, что только так и можно получать растюшки на геле. Ввели кусочек ткани растения, получили непонятно что, воздействовали гормонами, получили корни/листья/побеги (нужное подчеркнуть) и ковыряемся дальше. А на деле так поступают очень редко, в виду высокой вероятности получения мутантов (может отдельно напишу про изменчивость растений), сложности данного процесса и относительно низкой повторяемости.
Вот примеры, один интернета и один свой:
То, как происходит морфогенез через каллус.
Фото отсюда: https://ppt-online.org/98351
Нарезали, простерилизовали, ждём.
Фото отсюда: https://instagram.com/shiner420tc
Дождались гейхер. Как видите, часть черешков не проросла.
Фото личное.
Каллус получают не только для последующего образования целого растения, но и для получения корней, например, который выделяют метаболиты нужные для косметической, фармацевтической, химической промышленности, но это другая тема.
Например, корневая культура корней лекарственных растений.
Фото отсюда: https://docplayer.com/53657962-Biotehnologiya-lekarstvennyh-...
2) Часто люди считают, что растения in vitro = меристемный, оздоровлённый, безвирусный посадочный материал. Продавцам это на руку, можно кричать, что у них супер-суперэлита без предоставления результатов тестирования, ведь растения якобы меристемные. На деле, без доказательств безвирусности, нельзя утверждать об отсутствии этих вирусов. Как с ковидом сейчас, пока пцр-тест отрицательный, вы считаетесь здоровым)
Введение семенами удобно, когда эти самые семена есть, либо когда растение очень плохо вводится зелёными частями. Например, непентес очень часто так вводят в культуру, так проще.
Стерилизации семян.
Видео отсюда: https://instagram.com/floravitro
Проросшие семена непентеса.
Фото отсюда: https://instagram.com/floravitro
Собственно, сами растения непентеса!)
Фото отсюда: https://instagram.com/floravitro
Проросшее семя валерианы лекарственной.
Фото отсюда: https://instagram.com/marusyagod
Ещё очень часто вводят растения черенками. Лично мое мнение, этот способ самый быстрый, легкий и самый распространённый.
Введённый побег растения.
Фото личное.
Ещё один побег в агар-агаре.
Фото отсюда: https://instagram.com/nextagro.ru
И на сладенькое, введение меристемой очень трудозатратный способ, так как нужно выделить из почки лишь конус нарастания, который часто не превышает нескольких десятых миллиметра. Процесс выделения одной меристемы может занимать несколько часов, ведь нужно вырезать кусочек размером с точку от тонкой шариковой ручки. Эту работу чаще всего выполняют с помощью различных увеличительных приборов. Такой способ имеет преимущества в виде более энергичных растений, большей вероятности освобождения от возможных вирусов, лучшего процента введения.
Ввели меристему.
Фото личное.
Она начала расти.
Фото личное.
Уже совсем взрослая, аж месяц-полтора.
Фото личное.
Прошёл ещё месяц.
Фото личное.
Наконец «взрослое» растение.
Фото личное.
Растения на последних фото с примерами меристем не одни и те же, но в целом отражают рост и внешний вид того, что нужно.
Как-то так. И вот вам розочка)
Фото личное.
В посте использовал фото и видео свои и из разных источников:
https://instagram.com/marusyagod
https://m.vk.com/meristem
https://instagram.com/nextagro.ru
https://instagram.com/floravitro
https://docplayer.com/53657962-Biotehnologiya-lekarstvennyh-...
https://ppt-online.org/98351
https://instagram.com/shiner420tc